一、外伤感染模型构建选择依据
| 模型类型 | 适用研究 | 模拟临床场景 |
|---|---|---|
| 急性切口感染 | 早期清创与抗生素疗效评估 | 手术切口感染 |
| 全层皮肤缺损感染 | 慢性伤口愈合机制 | 糖尿病足溃疡感染 |
| 异物植入感染 | 生物膜相关感染治疗 | 导管/植入物相关感染 |
| 烧伤感染 | 烧伤后铜绿假单胞菌感染 | 烧伤创面脓毒症 |
二、标准化操作流程（以金黄色葡tao球菌感染的全层皮肤缺损模型为例）
1. 材料准备
动物：C57BL/6或BALB/c小鼠（8-10周龄，雄性更佳）
病原体：金黄色葡tao球菌（USA300，MRSA临床株）
器械：活检穿孔器（6 mm直径）、红外线测温仪、无菌缝合包
2. 手术步骤
术前处理：
麻醉（异fu烷），背部剃毛，碘伏+酒精交替消毒3次。
皮下注射镇痛药（如卡洛芬5 mg/kg）。
创面制作：
用活检穿孔器在背部脊柱旁制造全层皮肤缺损（直径6 mm，深达筋膜层）。
止血（无菌棉签轻压）。
细菌接种：
取对数生长期菌液（OD600=0.6），PBS调整至1×10^7 CFU/20 μL。
将20 μL菌液均匀滴加至创面，覆盖无菌硅胶圈（防止舔舐）。
术后管理：
单笼饲养，每日观察创面渗出、红肿情况。
3. 关键参数
细菌剂量：1×10^7 CFU/创面（导致持续感染但不致死）
观察周期：3天（急性期）、7-14天（慢性期/愈合评估）
三、其他常见外伤感染模型构建
1. 急性切口感染模型
操作：
背部做1 cm手术切口，深达皮下。
切口内注入10 μL菌液（1×10^6 CFU）。
4-0丝线缝合，48h后拆线观察感染。
适用：术后切口感染预防研究。
2. 异物植入感染模型（生物膜研究）
操作：
皮下植入无菌硅胶片（5×5 mm）。
接种5 μL菌液（1×10^5 CFU）于植入物表面。
7天后取出植入物，超声震荡后CFU计数。
检测：扫描电镜观察生物膜结构。
3. 烧伤感染模型
操作：
背部90℃热水接触10秒，制造Ⅲ度烧伤（需病理确认）。
立即接种铜绿假单胞菌（1×10^5 CFU）。
覆盖半封闭敷料模拟临床环境。
四、感染评估与数据分析
| 检测指标 | 方法 | 感染判定标准 |
|---|---|---|
| 创面评分 | 0-4分制（红肿、化脓、坏死） | ≥2分提示感染确立 |
| 细菌载量 | 创面组织匀浆CFU计数 | >1×10^5 CFU/g组织 |
| 组织病理 | HE染色（中性粒细胞浸润） | 每高倍镜视野>50个中性粒细胞 |
| 炎症因子 | 创面组织qPCR（IL-1β、TNF-α） | 表达量上调≥5倍 |
| 生物膜检测 | 结晶紫染色或活/死菌荧光染色 | 植入物表面菌群聚集形成膜结构 |
五、注意事项与优化策略
感染剂量控制：
预实验确定不导致全身播散的局部感染剂量（如MRSA USA300的LD50约1×10^8 CFU）。
创面标准化：
使用活检穿孔器可保证创面大小一致，避免手工切割的变异性。
减少动物自损：
佩戴Elizabethan项圈或使用苦味剂（如Denatonium benzoate）防止舔舐。
模拟慢性伤口：
糖尿病小鼠（db/db）或局部应用糖皮质激素延缓愈合。
六、模型局限性及解决方案
局限性：
小鼠皮肤愈合速度远快于人类（需延长观察期或使用免疫抑制）。
难以模拟人类伤口的复杂微生物组。
解决方案：
联合多种病原体（如金葡+铜绿假单胞菌）模拟混合感染。
使用猪模型（皮肤结构与人类更相似）。
