脑脊髓炎动物模型构建
一、实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型
（模拟多发性硬化/MS）
1. 经典诱导方法
| 模型类型 | 适用动物 | 抗原与佐剂 | 疾病进程 |
|---|---|---|---|
| 主动免疫EAE | C57BL/6小鼠 | - MOG₃₅-₅₅肽（100-200 μg） - 完q弗氏佐剂（CFA）+ 百日咳毒素（PTx，200 ng） | 慢性进展性，12-14天发病 |
| SJL/J小鼠 | - PLP₁₃₉-₁₅₁肽（50-100 μg） - CFA + PTx | 复发-缓解型，7-10天发病 | |
| 过继转移EAE | B6/SJL小鼠 | - 体外用MOG激活T细胞，静脉回输（5×10⁶个细胞） | 快速发病（3-5天），避免佐剂干扰 |
2. 关键步骤
免疫方案：
皮下注射抗原乳化液（脊柱两侧4点，共100 μL）。
PTx腹腔注射（0天及2天，各200 ng）。
疾病评分（0-5分标准）：
0: 无症状
1: 尾部无力
2: 后肢轻瘫
3: 后肢完q瘫痪
4: 四肢瘫痪
5: 濒死状态
3. 注意事项
品系差异：C57BL/6小鼠需PTx增强血脑屏障穿透，SJL/J小鼠易复发。
病理验证：脊髓切片LFB染色（脱髓鞘）、CD4+ T细胞浸润（免疫组化）。
二、病毒性脑脊髓炎模型
（如西尼罗河病毒、单纯疱疹病毒等）
1. 西尼罗河病毒（WNV）模型
动物：C57BL/6小鼠（6-8周龄）。
方法：
脚垫注射WNV（10³-10⁴ PFU），3-7天后出现神经症状（震颤、瘫痪）。
检测：
脑组织病毒载量（qPCR）、神经元死亡（Fluoro-Jade C染色）。
2. 单纯疱疹病毒（HSV-1）脑炎模型
方法：
鼻腔接种HSV-1（10⁶ PFU），病毒沿嗅神经入脑。
病理：
海马和皮层炎症（Iba1+小胶质细胞活化）、病毒抗原（HSV-gB染色）。
三、细菌/寄生虫性脑脊髓炎模型
1. 结核性脑膜炎（TBM）模型
动物：BALB/c小鼠。
方法：
尾静脉注射结核分枝杆菌（H37Rv株，10⁶ CFU），4周后脑干出现肉芽肿。
2. 弓形虫脑炎模型
方法：
腹腔注射刚地弓形虫（ME49株，10²-10³速殖子），慢性期（4周后）形成脑包囊。
四、脑脊髓炎动物模型构建选择与验证要点
| 研究目标 | 推荐模型 | 检测终点 |
|---|---|---|
| 自身免疫脱髓鞘 | MOG₃₅-₅₅诱导EAE | 临床评分、脊髓LFB染色 |
| 病毒感染致神经损伤 | WNV颅内接种 | 病毒载量、神经元凋亡 |
| 血脑屏障破坏机制 | 过继转移EAE | 荧光s钠渗透率、ZO-1蛋白表达 |
| 慢性神经炎症 | 弓形虫ME49感染 | 脑包囊计数（PAS染色）、IFN-γ水平 |
五、注意事项
伦理与生物安全：
病毒模型需在BSL-2/3实验室操作（如WNV为BSL-3）。
对照设计：
佐剂对照组（仅CFA+PTx）、空白对照组（PBS注射）。
动态监测：
EAE模型需每日评分，病毒模型监测体重和神经症状。
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